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          實驗室以及野外如何檢測熒光蛋白GFP RFP YFP

          發布時間:2022-05-19   點擊次數:181次

            對蛋白亞細胞定位的認知可能表明,蛋白可能在許多細胞進程中發揮作用。如果與下面所列的其中一種細胞器特異性試劑共定位,那么可確認目的蛋白的亞細胞位置。雖然這些細胞器標記物可用作強大的免疫熒光工具,但它們還可用作碎裂細胞裂解物的蛋白質印跡對照。

          這些蛋白的表達可能在不同細胞和組織中有所不同。

            熒光蛋白的發光原理在于其發色基團經一定波長的光(激發光)照射后被激活,并將能量以光能形式釋放,這時我們就能在熒光顯微鏡下看到日思夜想的熒光色啦!   

          但由于能量不能全以光的形式輻射出來,所以熒光蛋白的發射光(熒光)的波長比激發光長。

          那么我們是怎么將熒光蛋白分類的呢?通常,人們按發射波長來分類并定義其顏色(下圖)。

          RFPs(紅色熒光蛋白): 

          mCherry具有優異光穩定性,通用紅色單體(但融合表達時有較弱的齊聚效應)

          tdTomato具有mCherry相同的光穩定性,亮度強,是追蹤表達水平的理想選擇,但為串聯二聚體,可以在融合標簽大小不干擾蛋白質功能的情況下使用

          mStrawberry信號亮的紅色單體,但光穩定性要弱于mCherry

          DsRed是細胞毒性小的RFP

          mApple在蛋白的融合表達中是mCherry不錯的替代物,但其光穩定性要遠弱于mCherry

          mKate2從參數方面考量是綜合亮度、光穩定性和齊聚性的RFP。

          OFPs(橙色熒光蛋白):

          mOrange橙色單體

          YFPs(黃色熒光蛋白):

          mVenus是亮度極高的黃色單體

          GFPs(綠色熒光蛋白):

          EGFP

          BFPs(藍色熒光蛋白):

          mTagBFP2穩定,成熟快、亮度極亮的藍色單體

          上面是通用一些熒光蛋白參數,再好的載體也需要找對合適的光源,光源的選擇對于載體信號的激發也是不可或缺的,美國LUYOR公司實驗室儀器事業部致力于研究和開發熒光觀測裝備,其產品系列有 LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀測燈,LUYOR-3430、LUYOR-3260單熒光蛋白觀測手電筒。熒光是各種各樣細胞生物學、神經系統學及其他領域研究中的一種強大和廣泛使用的工具。LUYOR的LUYOR-3415RG和LUYOR-3430、LUYOR-3260除了可用于篩選轉基因生物外,還可以用于樣本的預篩選、輔助解剖、用于珊瑚研究等

            

          LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀察燈的用途:

          用于檢測、篩選轉綠色熒光蛋白(GFP)和紅色熒光蛋白(DsRed)基因的植物、動物及微生物,如水稻、玉米、斑馬魚、小鼠、細:菌、真菌等等...

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          LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀察燈的產品優勢:

          1. 大功率輸出,無需暗室,也可輕松激發熒光。

          2.檢測效率高,黑暗中檢測一目了然

          3.LED壽命50000h,且系統穩定,可長時間使用 

          4.直接檢測,而無需用底物顯色,所以安全,對被檢測對象無傷害

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          激發光源激發出綠色熒光時,用黃色濾光鏡觀測,可檢測含綠色熒光蛋白(GFP)的生物;激發光源激發紅色熒光時,用紅色濾光鏡觀測,可檢測含紅色熒光蛋白(DsRed)的生物。

           


          注:


          1. LUOYR-3415R用于觀測綠色熒光蛋白


          GFP:綠色熒光;  fluorescein熒光素


          2. LUOYR-3415C用于觀測黃色熒光蛋白


          YFP:黃色熒光蛋白;  Venus:金色;  Lucifer Yellow:熒光黃


          3. LUOYR-3415G用于觀測紅色熒光蛋白


          DsRed:紅色熒光蛋白;   TdTomato:番茄紅


          4. LUOYR-3415V用于觀測紫色熒光蛋白


          CFP:青色熒光蛋白;   BFP:堿性胎兒蛋白


          5. LUOYR-3415U用于觀測:


          DAPI:藍色熒光


          LUYOR-3415熒光蛋白激發光源的物理技術參數:

          波長:可任意選擇2種波長:365nm,400nm, 450nm, 485nm,520nm


          質量:凈重0.9kg,毛重:4kg,尺寸:180x200mm(長x高),頭部直徑120mm。


          功率:單波長15w,總功率27w。


          輸入電壓:交流100-260v,頻率50/60Hz。


          包裝箱尺寸:400x300x150mm(長x寬x高)


          距燈150mm處照射直徑為180mm。


          LUYOR-3415熒光蛋白激發光源的標準配置:

          luv-50觀察眼鏡,luv-30觀察眼鏡,說明書,合格證,保修卡,鋁合金手提箱。


          LUYOR-3415熒光蛋白激發光源的主要產品應用:

          檢測轉綠色熒光蛋白(GFP)基因、紅色熒光蛋白(DsRed)基因植物:水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥

          檢測轉GFP、DsRed基因動物:小鼠、兔子、猴子等;

          檢測轉GFP、DsRed基因微生物:細菌、真菌、酵母等;

          檢測GFP、DsRed基因組織特異性表達;


          上海路陽儀器有限公司

          上海路陽儀器有限公司

          地址:上海市松江區新橋鎮泗磚南路255弄120號

          主營產品:黑光燈,探傷燈,紫外線探傷燈,LED磁粉探傷燈,熒光檢漏燈,熒光檢漏劑,檢漏手電筒,脫脂檢測燈

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